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ELISA試劑盒抗體反應使抗原固相化
更新時間:2018-01-26   點擊次數(shù):2443次

ELISA試劑盒因而含雜質較多的抗原也可采用捕獲包被法,實驗的特異性、敏感性均由此得以改進,重復性亦佳。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是經(jīng)過物理吸附的,靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體外表的疏水基團間的作用于??蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照耀(例如30W紫外燈,75cm照耀12小時),以添加其吸附性能。例如,在查看抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,ELISA試劑盒而遍及的固相載體通常不能直接與核酸。換言之,包被便是抗原或抗體到固相載體外表的進程。當抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時,抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充沛暴露,在這種情況下,直接包被作用欠安,能夠采用直接的捕獲包被法,即先將對于該抗原的特異抗體作預包被,這以后經(jīng)過抗原。也可用親和素生物素系統(tǒng)作直接包被,即用親和素先包被載體,然后參加生物素化的DNA,這種包被辦法均勻、牢固,已擴展應用于各種抗原物質的定量測定。
ELISA試劑盒的基本原理有三條:
(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體外表,可能是蛋白和聚苯乙烯外表間的疏水性部分彼此吸附,并堅持其免疫學活性;
(2)抗原或抗體可經(jīng)過共價鍵與酶銜接形成酶物,ELISA試劑盒而此種酶物仍能堅持其免疫學和酶學活性;
(3)酶物與相應抗原或抗體后,可根據(jù)參加底物的色彩反響來斷定是不是有免疫反響的存在,并且色彩反響的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,因而,能夠按底物顯色的程度顯示實驗成果。法是免疫診斷中的一項新技術,現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所導致的流行癥、寄生蟲病及非流行癥等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,ELISA試劑盒根據(jù)現(xiàn)已使用的成果,以為法具有靈敏、特異、簡略、快速、安穩(wěn)及易于自動化操作等特色。不只適用于標本的查看,并且由于一天以內能夠查看幾百乃至上千份標本,因而,也適合于血清流行病學調查。

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